的PCR擴(kuò)增儀都是全自動的
點(diǎn)擊次數(shù):2281 更新時間:2019-02-25
的
PCR擴(kuò)增儀都是全自動的
隨著現(xiàn)代技術(shù)的發(fā)展,PCR擴(kuò)增儀已經(jīng)不是傳統(tǒng)的分析方法,現(xiàn)在的PCR擴(kuò)增儀都是全自動的,所以我們也可以把擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析合并,合并為擴(kuò)增產(chǎn)物分析室。
對普通PCR儀來說,溫度控制指標(biāo)主要是指溫度的準(zhǔn)確性、均勻性、以及升降溫速度,對羅氏定量PCR儀來說,除了溫度的準(zhǔn)確性和均勻性、升降溫速度以外,還必須考慮儀器在梯度模式和標(biāo)準(zhǔn)模式下是否具有同樣的溫度特性。
溫度的準(zhǔn)確性是指樣品孔溫度與設(shè)定溫度的一致性,它直接關(guān)系到實(shí)驗的成敗。如果排除樣品加入過程中的問題,對于PCR反應(yīng)而言zui重要的莫過于溫度控制的準(zhǔn)確性,由于PCR是一個幾何級數(shù)擴(kuò)增的過程,擴(kuò)增過程中退火溫度的細(xì)微變化會被放大而直接影響結(jié)果,不論是變性、退火還是延伸都需要準(zhǔn)確控制溫度,對退火溫度而言溫控顯的尤為重要,有時1度甚至0.5度的差異也能決定實(shí)驗的成功與失敗,所謂差之毫厘,謬之千里。
因而對PCR擴(kuò)增儀而言溫度控制就意味著質(zhì)量。溫度的均勻性是指樣品孔間的溫度差異,它關(guān)系到在不同樣品孔進(jìn)行反應(yīng)結(jié)果的一致性。我們在實(shí)驗中發(fā)現(xiàn)有時用同樣的樣品,同樣的PCR反應(yīng)程序,zui后的結(jié)果竟然差異非常明顯,或許就是因為不同位置的溫度不均一性所致。
PCR擴(kuò)增儀通過提供準(zhǔn)確的溫度控制,提供變性、退火、延伸三個步驟溫度控制,實(shí)現(xiàn)基因的不斷擴(kuò)增,達(dá)到PCR定性分析的目的,廣泛應(yīng)用于科研研究、教學(xué)、醫(yī)學(xué)臨床、檢驗檢疫等機(jī)構(gòu)。